|
抑制CYP2E1增强何首乌水提物肝毒性作用及其毒性成分筛选研究
胡英还, 王子建, 李登科, 全正扬, 王呈谕, 孙震晓
2021, 18(3):
206-212.
DOI: 10.19803/j.1672-8629.2021.03.02
摘要
(
126 )
PDF(1731KB)
(
183
)
目的 研究肝细胞色素氧化酶P450 (CYP450)亚 型CYP2E1与何首乌肝毒性的关系并筛选有关毒性成分。方法 MTT法检测CYP2E1特异性抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)作用后何首乌水提物(PMR)对人肝细胞L02的毒性作用,及PMR和6种成分2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4-tetrahy-droxy stilbene glycoside, TSG)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D- glucoside, EG)、大黄素(emodin, EM)、没食子酸(gallic acid, GA)、大黄素甲醚(physcione, PH)和大黄酸(rhein, RH)对稳定转染shCYP2E1的HepaRG细胞的毒性作用;利用CYP2E1特异性抑制剂4-甲基吡唑(4-methylpyrazole, 4-MP)作用大鼠,进一步验证何首乌对大鼠的肝毒性作用与CYP2E1抑制的关系。结果 DDTC处理L02细胞24 h后,CYP2E1活性显著下降(P<0.05),PMR联用DDTC后细胞活力明显下降(与PMR、DDTC组相比,P<0.01);成功构建了HepaRG-shCYP2E1细胞系,与空质粒对照组相比,其CYP2E1 mRNA表达下降70%以上;与对照组相比,何首乌提取物PMR、EM、PH及RH对HepaRG-shCYP2E1的细胞毒作用显著增加(P<0.01),而TSG和EG在一定浓度下细胞毒作用降低(P<0.01);大鼠实验表明,何首乌与CYP2E1抑制剂联合作用于大鼠后,与空白组、抑制剂组相比,ALT及AST的水平均明显升高,与何首乌组相比,AST水平显著升高,说明大鼠体内CYP2E1被抑制后,何首乌的肝毒性作用增强。结论 CYP2E1活性或表达下降可导致何首乌水提物肝细胞毒性及大鼠肝毒性增加,其毒性成分可能为游离蒽醌类成分EM,PH及RH。
参考文献 |
相关文章 |
计量指标
|