疏风解毒胶囊对甲型流感病毒H1N1特异性抗体的影响
李欣颖, 包蕾, 李舒冉, 赵荣华, 孙静, 谢丹, 鲍岩岩, 郭姗姗, 崔晓兰, 耿子涵
2025, 22(8):
841-850.
DOI: 10.19803/j.1672-8629.20250170
摘要
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目的 探讨疏风解毒胶囊(SFJD)对甲型流感病毒(H1N1)感染小鼠特异性抗体分泌的影响,并通过体外模型研究其对B细胞激活的调控机制。方法 建立H1N1非致死性感染小鼠模型,随机分为正常组,PR8模型组,阳性药磷酸奥司他韦组(27.5 mg·kg-1·d-1),SFJD高、中剂量组(2.288 g·kg-1·d-1、1.144 g·kg-1·d-1),并将各组小鼠随机分为感染第0、2、4、6、8天共计5个时间点组。第0至第4天进行灌胃给药,于以上时间点对各组小鼠取材,分别称量各组小鼠肺重和体重,计算肺指数;采用高通量液相蛋白芯片多因子法,检测肺泡灌洗液中的总IgA、IgM、IgG;采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测H1N1特异性IgA、IgM与IgG。于第8天,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)法,检测各组小鼠肺组织病毒载量;使用Micro-CT,观察小鼠肺部影像;采用流式分析法,检测外周血和肺泡灌洗液B细胞百分比。将人肺上皮细胞(BEAS-2B)分为正常对照组,病毒感染组,阳性药组(62.5μmol·L-1),SFJD高、中剂量组(15.6、7.8μg·mL-1);小鼠肺上皮细胞(MLE12)分为正常对照组,病毒感染组,阳性药组(250μmol·L-1),SFJD高、中剂量组(62.5、31.3μg·mL-1)。采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法,检测SFJD对呼吸道上皮细胞B细胞刺激因子(BAFF)表达的影响。结果 SFJD可降低第4天至第8天H1N1感染小鼠的肺指数(P<0.05);降低第8天病毒载量(P<0.01),减轻炎症病变,升高外周血及肺组织中的B细胞比例(P<0.01,P<0.001);降低第 8天肺泡灌洗液中总IgA水平,升高总IgM水平(P<0.01);降低第4天肺泡灌洗液中特异性IgA(P<0.000 1)的分泌、促进第8天特异性IgM(P<0.000 1)、IgG(P<0.000 1)的分泌;同时,SFJD可抑制呼吸道上皮细胞系BAFF表达(P<0.05,P<0.001)。结论 SFJD在H1N1感染早期给药,可恢复外周血B细胞比例,促进其向肺组织浸润,增强病毒特异性IgM和IgG分泌,发挥抗病毒效果。同时,SFJD通过抑制呼吸道上皮细胞BAFF表达,防止B细胞过度激活,进而调节感染后的体液免疫应答。
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